血液質(zhì)控單克隆抗體-是檢測心肌肌鈣蛋白T和I（相應(yīng)的是cTnT和cTnI）的免疫檢測基礎(chǔ)，第一次報告是在約25年前。希望它們對急性心肌梗死（AMI）有更準(zhǔn)確的診斷，因為改善了組織特異性。在開始臨床試驗后，很快地認(rèn)識到心肌特異性的優(yōu)點；沒有預(yù)料到在沒有傳統(tǒng)的AMI診斷指標(biāo)的患者中，發(fā)生了“太早”升高的cTnT和cTnI；被初始相信理解為生物標(biāo)志物的診斷特異性。進(jìn)一步的臨床研究確定了這些發(fā)現(xiàn)的真實原因：很小的心肌傷害。這些新的發(fā)現(xiàn)，使得cTn檢測導(dǎo)致對心肌梗死的重新定義，最后為急性冠脈綜合征（ACS）的新的臨床診斷分類。在新的診斷范例中，AMI是ACS的一個亞組，二者情況可由cTnT和cTnI升高是否高于預(yù)先決定的判斷限值給出診斷。缺血性心肌損害診斷的未來演變，已經(jīng)確認(rèn)了7個類型的AMI，這在早期使用肌鈣蛋白是沒有預(yù)料的發(fā)展。
除了cTnI證實的心肌組織特異性和第二代cTnT檢測改善的特異性外，生物標(biāo)志物濃度的上升已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)在非缺血的心肌疾病，如腎衰和心衰，在心臟中毒的藥物給予后、和在敗血癥和中風(fēng)下。研究這些升高的原因，揭示了非缺血性心肌壞死作為cTn從損害的心肌細(xì)胞內(nèi)釋放的原因。它也已經(jīng)被通過風(fēng)險分層評估的過程確定，這些升高，無論是缺血性的還是非缺血性的，預(yù)示了更糟的臨床后果，即使cTn濃度沒有超過你預(yù)先設(shè)定的診斷判斷限值。但與cTn的診斷角色相反，風(fēng)險分層評估是一個統(tǒng)計過程，依據(jù)cTn和其他風(fēng)險標(biāo)志物濃度，證實一組患者和指定一個臨床結(jié)果的某些可能性。
在引入到臨床實踐時，cTn檢測被預(yù)期可簡化AMI的診斷，但是它看來，它是臨床診斷的一個打開的潘多（Pandora）拉魔盒。盡管cTn使得診斷AMI在消除了因非特異原因的復(fù)雜性后有點簡單，但準(zhǔn)確解釋cTn濃度依然要求臨床專家和實驗室的專家。進(jìn)一步復(fù)雜化了這個狀態(tài)現(xiàn)狀是，在臨床實踐中遇到了未預(yù)期的cTn結(jié)果時，必須考慮一系列分析變異。其他的如cTnT mRNA的拼接、cTnT和cTnI二者轉(zhuǎn)譯后修飾的各個形式、循環(huán)的cTnT、cTnI和肌鈣蛋白C（TnC）的單體、雙聚體、或三聚體；cTnI的生理的磷酸化作用等，均已經(jīng)在文獻(xiàn)中報告，作為cTn結(jié)果和臨床表現(xiàn)間不符的原因。循環(huán)抗-cTn自身抗體、封閉檢測抗體的結(jié)合、和人抗鼠抗體（HAMA）等，會在肌鈣蛋白檢測中出現(xiàn)外加的分析干擾，導(dǎo)致假陰性和假陽性的肌鈣蛋白結(jié)果。
2017年6月美國臨床化學(xué)雜志上Katrukha等，研究了cTnT轉(zhuǎn)譯后修飾的另一種形式，是被凝血酶蛋白水解的降解，一個絲氨酸蛋白水解酶凝聚因子，會在缺血組織壞死處作用、或存在于收集血液后的人血清內(nèi)。作者提供了通過凝血酶對cTnT蛋白水解的實驗證據(jù)，可以在體外改變cTnT氨基酸序列。他們展現(xiàn)了在活躍的凝血酶存在下，cTnT分子的縮短；但可以被特定的凝血酶抑制劑封閉。使用質(zhì)譜分析，他們證實了一個29-kDa蛋白水解的碎片，被切的斷裂位點在氨基酸第68和第69位置間，是一個精氨酸-絲氨酸序列，被考慮是凝血酶活性的特定位點。他們的發(fā)現(xiàn)與近期Streng等研究一致，他們展現(xiàn)了初步證據(jù)，隱含凝血酶是對cTnT降解的潛在物質(zhì)之一。Katrukha和合作者延伸了這些研究，并提供了強(qiáng)烈的證據(jù)，凝血酶可切斷cTnT，產(chǎn)生觀察到的降解。
凝血酶不僅是一個蛋白水解的酶，也會是cTnT降解的主要作俑者。μ-鈣蛋白酶（calpain）和半胱天冬蛋白酶（caspase），在cTnT的降解中起著一個活躍的角色，這是Di Lisa和其他展現(xiàn)的。盡管μ-鈣蛋白酶和半胱天冬蛋白酶主要活躍在細(xì)胞內(nèi)，在體內(nèi)生理的影響；凝血酶解調(diào)的降解看來是細(xì)胞外的，大多在體外。它會發(fā)生在梗死位點，但它也在血液收集管內(nèi)的凝集中發(fā)生作用。事實是，多個酶共同消化cTnT，可解釋該事實，Katrukha和合作者在凝血酶抑制劑下不能完全預(yù)防cTnT的降解。他們的蛋白印跡分析也顯示了在患者血清中存在著較小分子量的cTnT碎片；但不清楚的是，這些碎片是否來自被凝血酶切斷的多肽的進(jìn)一步消化、或它們來自完整cTnT分子，被其他非凝血酶的作用所致。原先的研究和這些小碎片產(chǎn)生的機(jī)制，不是近期文章的目標(biāo)，但是它很值得以后去研究。cTnT的蛋白水解消化不是獨特的。cTnI也是在體內(nèi)和體外二者的蛋白水解降解的一個目標(biāo)。病原體的這樣識別和導(dǎo)致改變cTn氨基酸序列，為實驗室學(xué)科提供了重要信息。檢測cTn濃度由免疫檢測實施，依據(jù)被試劑抗體識別氨基酸短的序列，所以被稱為決定簇。改變或丟失決定簇可減少或防止抗體的附著，導(dǎo)致假陰性實驗室結(jié)果。
盡管這是免疫檢測廠商的任務(wù)，去選擇抗體與某個決定簇反應(yīng)，不受酶降解的影響，臨床醫(yī)生使用檢測結(jié)果，也必須懂得以往未被識別的決定簇的喪失有真正的可能性；明顯假陰性結(jié)果時必須以另一個診斷程序進(jìn)行檢測。cTn大量的轉(zhuǎn)譯后消化也將使cTn檢測標(biāo)準(zhǔn)化和一致性復(fù)雜化，由于各種抗體將被不同影響，因降解和存在開裂的序列。cTn的酶降解研究，會證實對臨床實踐很有用，在廠商血液收集管內(nèi)含有酶抑制劑，預(yù)防了體外對肌鈣蛋白的蛋白水解。
隨著近期引入質(zhì)譜分析到臨床實驗室，你可假設(shè)，免疫檢測的干擾可以很快是過去的問題。但是，質(zhì)譜分光分析也會要求用抗體進(jìn)行免疫親和提取或免疫沉淀，cTn濃度檢測要求酶的消化，并由質(zhì)譜分光對特定多肽序列的確認(rèn)。丟失特征的多肽序列可來自體內(nèi)或體外的蛋白水解，會阻礙對cTn濃度檢測的準(zhǔn)確度，即使是質(zhì)譜分析。所以，cTn濃度的準(zhǔn)確定量，要求理解和cTn分子的內(nèi)部的-和外部的-心肌蛋白水解破碎。
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