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化學發光免疫法與放射免疫法檢測AFP的比較

文章來源:發布時間:2015年07月31日瀏覽量: 字體:

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羅煒(廣州呼吸病研究所)

王慧 陳柏銘(廣州醫學院第一附屬醫院檢驗科)



摘要 本文采用放射免疫法和化學發光免疫法平行測定60例臨床送檢血清標本的甲胎蛋白(AFP)含量,結果表明兩法的相關性良好(r=0.995),但化學發光免疫法的精密度和準確性均優于放射免疫法。



關鍵詞 化學發光免疫法 放射免疫法 甲胎蛋白



臨床檢測血清AFP常規多采用放射免疫法,而近年發展起來的化學發光免疫法因其快速、精確、重現性好及試劑安全無毒的特點,顯示出很好的應用前景[1]。為進一步了解化學發光免疫法的特點,本文報告用放射免疫法和化學發光免疫法對比檢測60例臨床血清標本中AFP的含量,并對結果進行統計分析和比較。



材料和方法



一、標本 隨機抽取60例臨床送檢血清標本。



二、儀器和方法 放射免疫法使用上海的SN-682型γ計數儀,中國原子能科學研究所的AFP試劑盒。化學發光免疫法使用美國Chiron公司的ACS180全自動化學發光儀和配套試劑盒。其測定原理為以吖啶酯作為發光底物,采用雙抗體夾心模式[2],即標本中的AFP抗原與固相中的單克隆AFP抗體結合,再與液相中以吖啶酯標記的多克隆AFP抗體結合。因待測AFP抗原總量與儀器測得的發光單位量(RLUs)存在正比的關系,由此求出AFP的含量。



結  果



一、線性實驗 將標準液按不同的濃度稀釋后做線性實驗,結果顯示放射免疫法和化學發光免疫法分別在5~400 ng/ml和2~940 ng/ml范圍內呈良好的線性關系。



二、對比實驗 用上述兩法同時對受檢血清標本進行定量分析。結果表明,兩法無顯著差異(P>0.05),相關系數r=0.995,直線回歸方程Y=-1.058+0.920X,提示兩法呈良好相關性。



三、回收實驗 取不同濃度的混合血清(AFP濃度為18.6,26.7,35.3 ng/ml),分別加入不同濃度的定值血清,用放射免疫法和化學發光免疫法測得的回收率分別為90.2~109.0%和91.0~107.3%,平均回收率為95.7%和96.4%。



四、精密度實驗 用兩法對低、中、高值質控品分別進行精密度實驗。附表中的結果表明化學發光免疫法的重復性較好。



附表 兩法的精密度對比



批內CV% 批間CV%



放射免疫法 化學發光免疫法 放射免疫法 化學發光免疫法

低值 5.27 3.20 6.55 3.40

中值 5.00 2.48 5.30 3.31

高值 4.50 3.50 5.38 4.71



討  論



化學發光免疫技術既具有發光檢測的高度敏感性,又具有免疫分析的高度特異性[3]。本文檢測AFP結果提示放射免疫法和化學發光免疫法之間無顯著差異(P>0.05),相關性好(r=0.995)。顯示化學發光免疫法在敏感性、特異性方面不僅可與放射免疫法相媲美,而且化學發光免疫法的準確性、精密度和試劑盒的有效期等方面均優于放射免疫法。由于化學發光免疫法是以化學發光劑作為標記物進行定量檢測,所以其試劑具有穩定和無毒性的優點。本實驗使用的全自動化學發光儀可以直接對血清標本進行采樣,處理和檢測,標本可以隨到隨測,短時間內出結果,較放免法大大縮短了時間,能充分滿足臨床的需要。因此本文認為,化學發光免疫法可廣泛應用于臨床項目的檢測。



參考文獻



[1]陶義訓主編.免疫學和免疫學檢驗.第二版.北京:人民衛生出版社,1997∶174

[2]章谷生.發光分析和發光免疫技術.余傳霖等主編.現代醫學免疫學.上海:上海醫科大學出版社,1999∶716

[3]張麗民.化學發光標記及發光免疫分析.基礎醫學與臨床.1995;15(4)∶247


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