作者：李嵐　董洪強　張瓊麗

  作者單位：深圳市第二人民醫院

【摘要】 目的 探討微柱凝膠免疫分析技術(MGIA)在檢測血小板抗體中的應用價值。方法 采用微柱凝膠免疫分析技術分別對146例血液病患者(實驗組)和87例健康體檢者(對照組)進行血小板抗體檢測。結果 146例患者中檢出血小板抗體28例。11例輸注機采血小板少于3個治療量的血液病患者均未檢出血小板抗體；輸注3～9個治療量的患者63例，8例血小板抗體陽性（12.70%）；輸注10～19個治療量的患者41例，8例血小板抗體陽性（19.51%）；輸注20～29個治療量的患者22例，6例血小板抗體陽性（27.27%）；輸注大于30個治療量的患者9例，6例血小板抗體陽性（66.67%)。結論 血小板抗體的產生與血小板輸注量和次數相關。微柱凝膠免疫分析技術(MGIA)檢測血小板抗體簡單快速，準確可靠,值得選擇。

【關鍵詞】 微柱凝膠免疫分析技術　血小板抗體　檢測　血小板輸注無效

血小板輸注對預防和治療因血小板減少或血小板功能缺陷引起的出血是一種有效的治療手段［12］，血小板輸注還可降低腫瘤患者因放、化療后嚴重的骨髓抑制、血小板減少導致出血的病死率［3］。然而，多次輸注后血小板減少癥患者的血小板輸注無效 (PTR)的發生率可達30%～70%［4］，其原因與反復輸注引起血小板抗體（HLA和HPA抗體）產生密切相關。采用一種簡便、快速又經濟的方法篩選血小板抗體有重要的臨床意義。我們使用微柱凝膠技術檢測血小板抗體，現報道如下。

1、對象與方法

1.1 檢測對象

選取我院血液科146例接受機采血小板輸注治療的血液病患者作為實驗組，其中急性淋巴細胞白血病16例，急性非淋巴細胞白血病25例，慢性粒細胞白血病17例，慢性淋巴細胞白血病19例，再生障礙性貧血9例，血小板減少性紫癜8例，骨髓瘤和淋巴瘤6例，骨髓增升異常綜合征3例，珠蛋白合成障礙貧血患者43例。146例患者輸注血小板時均無發熱、敗血癥、脾腫大、彌散性血管內凝血等情況，故排除了這些非免疫因素對血小板輸注療效的影響。同時，我們選擇87例健康體檢者作為對照組。

1.2 材料

6孔微柱凝膠板(長春博德)；指示紅細胞，包被有抗人IgG抗體。交聯試劑：含抗人IgG抗體，但與指示細胞上的抗人IgG抗體不同屬源，為“O”型血多人份供者混合血小板。

 

  1.3 檢測原理與方法

將受檢者血清、多人份供者混合血小板懸液（機采血小板用5倍0.5g·L-1
  EDTANa2）稀釋）和指示紅細胞各50μｌ依次加到微柱凝膠中，37℃孵育10min。指示紅細胞上包被有抗人IgG抗體，該抗體通過Fc段與指示紅細胞結合，若受檢者血清中含有抗血小板抗體，則結合于該抗體Fab段，形成“指示紅細胞（抗人IgG抗體）—血小板抗體—血小板”復合物，再加入0.5ml交聯試劑，則可將其連接形成網狀結構。微柱在一定離心力（1000r·min-1）的作用下，由于分子篩效應，這種網狀結構浮于凝膠表面，與游離紅細胞分開，而且凝膠還可將不同凝集程度的復合物分開，形成可疑（±）至陽性凝集（++++）。若受檢者血清中無血小板抗體，則不能形成網狀結構，指示紅細胞經離心后沉于凝膠底部，即為陰性。

1.4 結果判斷

陽性結果：指示紅細胞凝集塊位于凝膠表面或凝膠中，表明受檢者血清中存在血小板抗體，形成了網絡狀血凝復合物，判斷為陽性。陰性結果：指示紅細胞沉降于凝膠管底部，則提示未檢測到血小板抗體,不形成網絡狀血凝復合物，判斷為陰性。

1.5 血液來源

所有血液制品均來自深圳市血液中心。患者輸注血小板每袋為10個單位，即1個治療量，每個治療量（袋）內含血小板總數約2.5×1011個。

 

  2、結 果

2.1 血液病患者與健康體檢者血小板抗體的檢測

見表1 不同類型血液病與健康體檢者血小板抗體的檢測