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檢驗質(zhì)控
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了解新冠病毒的【常規(guī)檢測】和【快速檢測】

文章來源:發(fā)布時間:2022年04月27日瀏覽量: 字體:

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了解新冠病毒的【常規(guī)檢測】和【快速檢測】



一、核酸檢測的原理



核酸檢測即利用熒光
PCR 
技術(shù)檢測生物體核酸的過程。(PCR,全稱為聚合酶鏈式反應)。我們在采集咽拭子的時候,只采集非常少量的液體。然后看這非常少的液體里面有沒有新冠病毒,如果沒有或者非常少,就判定為陰性。里面如果病毒很多,就判定陽性。這是理想的情況。但事實是,即使新冠患者,也不會體液里面密密麻麻都是病毒,可能就是非常稀松的分散著,也就是濃度很低。濃度不高,就很難檢測到,所以就想辦法增加濃度。



如何增加濃度呢?就是利用
PCR 
的手段。



PCR 技術(shù)能夠利用特殊的酶在生物體外進行 DNA 片段復制,將特定的 DNA 片段擴增放大,從而達到能夠檢測的目的。也就是讓病毒的遺傳物質(zhì)翻倍,怎么知道翻了多少倍呢?用
Ct 
值(循環(huán)數(shù)閾值)表示。如
Ct20
,就是220次方倍;Ct40,就是240次方倍。



新冠病毒的核酸物質(zhì)是 RNA,因此檢測過程中首先要把 RNA 進行逆轉(zhuǎn)錄變成 DNA 后才能進行檢測。隨后由變性、退火、延伸三個基本反應步驟進行。



? 變性:DNA 雙鏈(模板)打開,變成單鏈 DNA



? 退火:特定引物(DNA 小片段)與單鏈 DNA 互補配對結(jié)合;



? 延伸:單鏈 DNA 合成雙鏈 DNA(半保留復制,在復制產(chǎn)生的兩條子代 DNA 雙鏈鏈中包含一條來自親代 DNA 的單鏈和一條新合成的 DNA 單鏈)。



隨后,重復循環(huán)以上三個步驟,獲得更多的半保留復制鏈,成為下個循環(huán)的模板,從而使原始微量
DNA 
模板特定區(qū)域得到指數(shù)級增加,放大幾百萬倍。





二、常規(guī)檢測和快速檢測的區(qū)別



簡單來說,常規(guī) PCR 檢測在樣本采集后需要進行核酸純化再進行后續(xù)
PCR 
反應,純大概需要約
30 ~ 60 min
。通常一塊反應板中可夠容納
96 
個獨立的反應同時進行,(最多檢測
91 
個樣本,外加
個質(zhì)控樣本),PCR
反應時間需要約
小時左右。而快速檢測在樣本采集后直接放入裂解液中釋放核酸,通常無須進行核酸純化可以直接進行
PCR 
反應,使用快檢專用儀器,檢測所需時間在
0.5 ~ 1.5 
小時左右。



快速檢測一般通量較小(每批次 2 ~ 16 個樣本),雖然單個樣本檢測時間縮短了,但進行大批量樣本檢測時,報告時間不占優(yōu)勢。例如要檢測
100 
個樣本,16
通道檢測需進行至少
批次,2
通道檢測
50 
批次。



因此,快速檢測適用于因特定原因需盡快獲得檢測結(jié)果、待檢人群數(shù)量較少、實驗室空間場地限制的情況。但對于高風險人群的檢測以及大規(guī)模人群篩查還是推薦使用常規(guī)檢測。

























(以上內(nèi)容來源于網(wǎng)絡(luò))


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